Forskel mellem HPLC og LCMS | HPLC vs LCMS

Nøgleforskel - HPLC vs LCMS

Lad os først se på betydningen af ​​HPLC og LCMS inden analysen af ​​forskellen mellem HPLC og LCMS. Kromatografi er en separationsteknik ved kemisk analyse, hvor prøvebestanddele adskilles under passage gennem et kromatografisk medium. Det indebærer også interaktion med prøven, stationær fase og mobil fase. HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, , og den anvendes som en væskekromatografimetode i analytisk kemi. Kombinationen af ​​ Væskekromatografi og Massespektroskopi (LCMS) er udviklet til kvantitativ analyse af udvalgte biomolekyler, og det er en meget følsom, præcis og specifik analyseprocedure sammenlignet med HPLC . Dette er nøgleforskellen mellem HPLC og LCMC . Denne artikel vil introducere dig til HPLC og LCMC, der beskæftiger sig med kemisk analyse og diskutere forskellene mellem HPLC og LCMS.

Hvad er HPLC?

Højytende væskekromatografi (HPLC) er en populær separationsteknik i analytisk kemi . Det er hovedsageligt , der bruges til at adskille komponenterne, for at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding . Tidligere var denne metode kendt som højtryksvæskekromatografi , fordi den var afhængig af pumper til at flyde et tryksat flydende opløsningsmiddel omfattende prøveblandingen gennem en søjle pakket med et fast adsorbentmateriale. Hver bestanddel i prøveblandingen interagerer forskelligt med det faste adsorbentmateriale, hvilket resulterer i forskellige strømningshastigheder for forskellige bestanddele. Dette kan føre til adskillelse af bestanddelene, når de strømmer ud af HPLC-søjlen.

HPLC er blevet anvendt til forskellige applikationer som f.eks. analyse af vitamin D-niveauer i blod , ulovlig brug af atleter af detektion af lægemiddelrester i deres urin, sortering af bestanddelene i en kompleks biologisk prøve til forskningsformål og analyse og fremstilling af lægemidler .

Hvad er LCMS?

Væskekromatografi-massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske adskillelsesevner ved væskekromatografi med masseanalysevnen af ​​massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separationsteknik, og massespektrometri anvendes til at analysere forholdet mellem masse og ladning af ladede partikler. Den fysiske adskillelse opnås sædvanligvis ved HPLC og alternativt er LCMS også kendt som HPLC-MS .LCMS er en dominant analytisk teknik , som har en meget høj nøjagtighed, følsomhed og specificitet sammenlignet med HPLC. Det er således nyttigt i mange anvendelser som forskningsformål, lægemiddelanalyse, fødevareanalyse osv. LCMS er hovedsageligt anvendt til at adskille, opdage, identificere og kvantificere biokemiske egenskaber af en bestemt prøve i nærvær af komplekse kemiske blandinger.

Hvad er forskellen mellem HPLC og LCMC ?

Akronym og definition af HPLC og LCMC

HPLC: HPLC står for højpræstationsvæskekromatografi. Det er en separationsteknik, der hovedsagelig bruges til at adskille komponenterne, for at identificere og kvantificere hver komponent i en blanding.

LCMS: LCMS står for Væskekromatografi og massespektrometri. Det er en analytisk teknik, der kombinerer de fysiske adskillelsesevner ved væskekromatografi med massanalyseværdierne for massespektrometri (MS).

Karakteristik af HPLC og LCMC

Klassificering

HPLC: Dette er kun en væskekromatografimetode.

LCMS: Dette er en kombination af væskekromatografi og massespektrometri metode.

Effektivitet

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og langsommere.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og hurtigere.

Følsomhed

HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere følsom.

Specificitet

HPLC: I sammenligning med LCMS er HPLC-analysen mindre specifik.

LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mere specifik .

Nøjagtighed

HPLC: HPLC giver mindre præcise resultater end LCMS til bestemmelse af nogle kemikalier.

LCMS: LCMS giver mere præcise resultater end HPLC til bestemmelse af nogle kemikalier.

Komponent

HPLC: HPLC kan betragtes som en bestanddel af LCMS.

LCMS: LCMS kan ikke betragtes som en komponent i HPLC.

Ion-kilde

HPLC: Ion-kilde findes ikke i HPLC-instrument.

LCMS: Ion-kilde er til stede i LCMS-instrument.

Anvendelser

HPLC: Ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved anvendelse af HPLC.

LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. Kontrast til HPLC kan LCMS bruges til at undersøge ufuldstændigt opløst blandinger.

Operation

HPLC: Diagrammet af et HPLC instrument er angivet i figur 1, og det omfatter normalt en autosampler, pumper og en detektor. Prøvetageren introducerer prøveblandingen i den mobile fase (trykblanding af opløsningsmidler, såsom vand, acetonitril og / eller methanol), som overfører det til søjlen. Pumperne leverer den ønskede strøm og sammensætning af mobilfasen gennem søjlen. Søjlen er fyldt med adsorbenten, som er en kornagtig fast partikel, såsom silica eller polymerer. Detektoren frembringer et signal, der står i forhold til mængden af ​​bestanddel af prøvebestanddel i søjlen, hvilket gør det muligt at kvantificere analyse af de udvalgte prøvebestanddele.HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse tilvejebringes af en digital mikroprocessor og brugersoftware.

Figur 1: Diagram over HPLC instrument

LCMS: Diagrammet af LCMS instrument er angivet i figur 2. Prøveekstraktet indsættes i kolonnen, der består af HPLC. Denne kolonne bevarer prøve-metabolitter baseret på fysiske tegn, og forskellige metabolitter strømmer til massespektrometeret ved forskellige tidsintervaller. Massespektroskopi anvendes til vurdering af masser af partikler til bestemmelse af elementarrangementet af et molekyle og til præcisering af molekylstrukturerne. Prøven skal imidlertid ioniseres for at generere ladede molekyler for at bestemme deres masse-til-ladningsforhold. I stedet for HPLC-instrumenter består LCMS derfor af yderligere tre moduler, såsom jernkilde, massanalysator og en detektor. En ionkilde kan omdanne gasfaseprøve til ioner og en masseanalysator, der grupperer ionerne ved deres masser ved anvendelse af elektromagnetiske felter. Endelig kvantificerer en detektor værdierne og leverer data af hver ion, som er til stede i prøven. LCMS-teknikken kan bruges til både kvalitative og kvantitative applikationer.

Figur 2: Diagram af LCMS-instrument

Som konklusion er HPLC en væskekromatografimetode, medens LCMS er en kombination af væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikker har forskellige karakteristika, men de kan bruges til at identificere og kvantificere fødevaresammensætninger, lægemidler og andre bioaktive molekyler.

Referencer Arpino, P. (1992). Kombineret væskekromatografi massespektrometri. Del III. Anvendelser af termospray. Massespektrometri Anmeldelser, 11 : 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. og Spoendlin, C. 2004). Praktiske aspekter af hurtig omvendt fase højtydende væskechromatografi ved anvendelse af 3 μm partikelpakkede søjler og monolitiske søjler i farmaceutisk udvikling og produktion, der arbejder under nuværende god fremstillingspraksis. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. og Kerns, E.H. (1999). LC / MS applikationer inden for lægemiddeludvikling. Massespektrometri Anmeldelser, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Kobling af matrixassisteret laser desorption / ionisering til væskeseparationer. Massespektrometri Anmeldelser 16 (5): 283. Image Courtesy: "Hplc" af Original uploader var Kjaergaard at en. wikipedia - Overført fra en. wikipedia. (Offentlig domæne) via Commons