Forskel mellem in situ hybridisering og immunhistokemi | In situ Hybridization vs Immunohistochemistry

Nøgleforskel - In situ Hybridisering vs Immunohistokemi

Kræft og infektionssygdomsdiagnostik er en populær tendens, hvor nye proteomiske og genomiske baserede teknikker anvendes til at identificere tumorer eller infektiøse celler, dets spredning og siderne for celleudvikling og analysere det genetiske grundlag for de fleste overførbare og ikke-smitsomme sygdomme. Dette vil resultere i nøjagtig behandling af lægemidler og design og udvikling af tilpassede terapier til sygdomme. In situ hybridisering (ISH) og immunhistokemi (IHC) er to så vidt anvendte teknikker i kræftbiologi, og nøgleforskellen mellem in situ hybridisering og immunokemi ligger i molekylerne, der anvendes i analyseproceduren. I ISH anvendes nukleinsyreproberne i analyse, mens i IHC anvendes monoklonale og polyklonale antistoffer til de diagnostiske bestemmelser.

INDHOLD

1. Oversigt og nøgleforskel

2. Hvad er In situ Hybridization

3. Hvad er Immunohistokemi

4. Ligheder mellem in situ hybridisering og immunhistokemi

5. Side ved side sammenligning - In situ Hybridisering vs Immunohistokemi i Tabular Form

6. Sammendrag

Hvad er In situ Hybridization (ISH)?

In situ hybridisering er en nukleinsyrehybridiseringsteknik, der udføres direkte på en del eller en sektion af væv, i hele vævet eller i celler. Teknikken afhænger af teorien om Watson Crick-komplementær baseparring, hvilket resulterer i enten DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider, der kan registrere muterede gener eller identificere det nødvendige gen af interesse. Enkeltstrengede DNA-sekvenser, dobbeltstrengede DNA-sekvenser, enkeltstrengede RNA-sekvenser eller syntetiske oligonukleotidsekvenser anvendes som prober under hybridiseringsteknik, og disse prober mærkes med et radioaktivt phosphor ved dens 5'-ende til identifikationsfremgangsmåder ved autoradiografi eller mærket under anvendelse af fluorescerende farvestoffer. Der findes forskellige typer ISH-teknikker, der er baseret på den anvendte type probe og typen af visualiseringsteknik, der følger.

Figur 2: Fluorescerende In situ Hybridisering

Der er mange anvendelser af ISH, hovedsagelig i molekylær diagnostik af infektionssygdomme for at identificere tilstedeværelsen af patogener og for at bekræfte patogenet via molekylær diagnostik.Den bruges også inden for udviklingsbiologi, karyotyping og fylogenetisk analyse og fysisk kortlægning af kromosomer.

Hvad er immunhistokemi (IHC)?

I IHC-teknikken er det analyserede hovedmolekyle antigenet. Under IHC anvendes monoklonale og polyklonale antistoffer til at bestemme tilstedeværelsen af antigener ved infektion eller malign celleproliferationsstatus. Teknikken er baseret på antigen-antistof binding, og enzymmærker anvendes til denne teknik; en sådan ansøgning er ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Markørerne kan også være fluorescerende mærket antistoffer eller radio-mærket antistoffer.

Figur 02: Immunohistokemi

IHC anvendes meget til kræftcelle detektion. Diagnostiske procedurer retter sig mod antigenerne til stede på tumorcellerne for at identificere og karakterisere tumoren. Den samme procedure er indarbejdet til diagnosticering af smitsomme stoffer. Monoklonale og polyklonale antistoffer anvendes også til at analysere forskellige genprodukter ved at muliggøre antistof-antigenbindende reaktion mellem det ønskede protein og det administrerede syntetiske antistof.

Hvad er lighederne mellem in situ-hybridisering og immunhistokemi?

ISH og IHC er meget specifikke reaktioner.

Begge teknikker er meget præcise.
Begge teknikker kan bruges til diagnosticering af kræft og smitsomme sygdomme.
Disse teknikker udføres i sterile in vitro-miljøer.
Begge er hurtige teknikker, som giver reproducerbare resultater.
ISH og IHC brug detekteringsmetoder som radio mærkning og fluorescens teknikker.
Hvad er forskellen mellem in situ hybridisering og immunhistokemi?

- diff Artikel Midt før Tabel ->

In situ Hybridisering vs Immunohistokemi

ISH er en nukleinsyrehybridiseringsteknik, som udføres direkte på en del eller en sektion af væv eller hele vævet.
IHC er en teknik, hvor monoklonale og polyklonale antistoffer anvendes til at bestemme tilstedeværelsen af antigener, som er specielle proteinmarkører placeret på celleoverfladerne.	Type af biomolekyler analyseret
ISH analyserer nukleinsyrer.
IHC analyserer proteiner-antigener.	Basis for biokemisk reaktion
Supplerende baseparering mellem DNA-DNA eller DNA-RNA forekommer i denne teknik.
Antigen-antistof-interaktioner er involveret i immunhistokemi.	Enzym-tilknyttede detektionsmetoder
Enzymbundne detektionsmetoder kan ikke anvendes i ISH.
Enzymbundne detektionsmetoder kan anvendes i IHC.	Sammendrag - In situ Hybridisering vs Immunohistokemi

Molekylær diagnostik er hurtige og bekræftende metoder, som kan anvendes til at identificere en ikke-overførbar sygdom, såsom kræft eller smitsom sygdom, sådan HIV eller tuberkulose baseret på de molekylære markører, der er til stede på cellerne hvilket fører til manifestationen af sygdommen. Molekylære markører kan være til stede i form af udtrykte proteiner eller på det genetiske niveau baseret på hvilke forskellige nye teknikker der indføres for at øge effektiviteten og er mindre besværlige, selv om der er en høj pris involveret i disse teknikker.ISH afhænger således af DNA-DNA eller DNA-RNA hybriddannelse, og IHC afhænger af de specifikke reaktioner mellem antistof og antigen. Dette er forskellen mellem in situ hybridisering.

Download PDF Version af In Situ Hybridisering vs Immunohistokemi

Du kan downloade PDF-versionen af denne artikel og bruge den til offline formål som pr. Citat notat. Venligst download PDF version her Forskel mellem in situ hybridisering og immunhistokemi.

Referencer:

1. Duraiyan, Jeyapradha et al. "Anvendelser af immunhistokemi. "Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, aug. 2012, tilgængelig her. Tilgænges 24. aug. 2017.

2. "In situ Hybridization (ISH). "National Center for Biotechnology Information, U. S. National Library of Medicine, tilgængelig her. Tilgængelig 24 Aug. 2017.

Billede Courtesy:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" Af MrMatze - Egentligt arbejde (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia

2. "Immunohistochemicalstaining2" Ved Imoen på det engelske sprog Wikipedia (CC BY-SA 3. 0) via Commons Wikimedia