Transformation vs transfektion | Forskel mellem transformation og transfektion

Anonim

Transformation vs Transfektion

Transformation og transfektion er to enkle teknikker, der bruges til at introducere et fremmed gen i en værtscelle. Disse teknikker afhænger imidlertid af typen af ​​værts- eller vektorsystemer.

Hvad er Cell Transformation?

Transformation er den teknik, der anvendes til at introducere gener i gær- og bakterieceller. Denne teknik forårsager normalt arvelige ændringer i gener, og således er genets udtryk permanent. Den bakterielle transformation blev først introduceret i 1928 af Frederick Griffith. Derefter i begyndelsen af ​​1970'erne blev denne teknik brugt i

E. coli. Under transformationsprocessen af ​​ E. coli, bliver cellerne gennemblødt i iskold opløsning af CaCl 2 . Dette trin gør E. coli celler kompetente. Derefter blandes de kompetente celler med plasmid-DNA'et og inkuberes på is i 20-30 minutter. Derefter gives der et kort varmechok for at muliggøre overførsel af DNA til cellen. Endelig anbringes cellerne i en næringsmedium og inkuberes ved 37 ° C i 60-90 minutter for at etablere plasmiderne. Når disse trin er afsluttet med succes, kan de transformerede celler anbringes på et egnet medium til udbredelse af celler. Siden transformation betragtes som en ineffektiv teknik, må den ikke anvendes til fremstilling af klonbanker.

Hvad er celletransfektion?

Transfektion er en metode til introduktion af et fremmed gen, sædvanligvis i pattedyrsceller. Der er to transfektionsmetoder; nemlig transient transfektion og stabil transfektion. Ved transient transfektion er genekspression tilgængelig i en begrænset periode; således forårsager ændringen af ​​gen midlertidigt udtryk. Denne transfektionsmetode er enkel og hurtig; Derfor kan den bruges rutinemæssigt. En ulempe ved transient transfektion er vanskeligheden med at anvende til storskala proteinsyntesesystemer.

Under stabil transfektion integreres et målgen i værtscelles genom og således er genekspression permanent, i modsætning til den transiente transfektion.

Hvad er forskellen mellem transformation og transfektion?

• Transformation er introduktionen af ​​et gen i en prokaryotisk celle (bakterie og gær), mens transfektion normalt kaldes indføring af et gen i en pattedyrcelle.

• Transformation resulterer i arvelig ændring i gener, mens transfektion kan resultere i enten midlertidigt udtryk eller permanente ændringer i gener.