Forskel mellem nitrocellulose og nylonmembran | Nitrocellulose vs Nylon Membran
Nøgleforskel - Nitrocellulose vs Nylon Membran
Blotting er en vigtig teknik til påvisning af specifikke sekvenser af DNA, RNA og proteiner fra deres blandinger i molekylærbiologi. Det gøres ved hjælp af en membran kaldet blot. Der er forskellige blotting teknikker som nordlige, sydlige og vestlige blotting. Valg af en passende membran til blottingprocessen bør udføres forsigtigt for at forhindre uspecifik bindende og forkerte detektioner. Nitrocellulose, nylon og PVDF er almindeligt anvendte membraner i blottingsteknikker. De har forskellige karakteristika. Nøgleforskellen mellem nitrocellulose og nylonmembran er, at nitrocellulosemembraner har et højt protein-immobiliseringspotentiale , mens nylonmembraner har et stort nukleinsyre immobiliseringspotentiale. Imidlertid anvendes begge typer membraner ofte i blottingsteknikker.
INDHOLD
1. Oversigt og nøgleforskel
2. Hvad er et nitrocellulosemembran
3. Hvad er et nylonmembran
4. Side om side Sammenligning -Nitrocellulose vs Nylon Membran
5. Sammendrag
Hvad er et nitrocellulosemembran?
Nitrocellulose membran er et almindeligt anvendt membranfilter i nukleinsyre og protein blotting teknikker. Det har et højt proteinbindingspotentiale. Derfor anvendes nitrocellulose membraner i vid udstrækning i western blotting teknik. Nitrocellulosemembraner er kompatible med alle hybridiseringsteknikker og viser overlegne bindingsevne uden forstyrrelser. Nitrocellulose membraner er naturligt hydrofile af natur. De gør hydrofile interaktioner med molekyler og immobiliserer dem effektivt på membranen. Kommercielle nitrocellulose membraner er tilgængelige i to porestørrelser: 0,45 og 0,2 μm.
Figur 01: Nitrocellulosemembran anvendt i western blotting
Hvad er et nylonmembran?
Nylonmembran er en anden type kommerciel membran, der anvendes i blottingsteknikker. Det anvendes alternativt med nitrocellulosemembraner til sydlig og nordlig blotting. Nylon membraner er ideelle til southern blotting end nitrocellulose på grund af deres høje affinitet til binding med DNA. På grund af flere unikke træk ved nylonmembraner bruger forskere almindeligvis nylonmembraner til sydlig og nordlig blotting i stedet for over nitrocellulose membran. Nylon membraner anbefales også til stripping og reprobing, i modsætning til nitrocellulose.
Figur 02: Nylonmembran anvendt til sydlig blotting
Hvad er forskellen mellem nitrocellulose og nylonmembran?
- diff Artikel Mellem før bord ->
Nitrocellulose vs Nylon Membran |
|
| Nitrocellulose membraner er skøre. | Nylonmembraner er mindre sprøde. |
| Håndtering | |
| De er vanskelige at håndtere. | De er nemme at håndtere. |
| Reprobing | |
| Ikke-støttede nitrocellulosemembraner er svære at reprobe. | Reprobing er let med nylonmembraner. |
| Kompatibilitet med forskellige opbevaringsforhold | |
| Nitrocellulose membraner har mindre styrke til at modstå forskellige opbevaringsforhold. | Nylonmembraner svarer mere robust til forskellige opbevaringsforhold. |
| Brug | |
| Forvaskning er påkrævet. | Forvaskning er ikke nødvendig for nylonmembraner. |
| Hydrofil Nature | |
| Nitrocellulose membraner er hydrofile af natur, men er mindre hydrofile end nylon membraner. | De er meget hydrofile af natur. |
| Immobiliseringspotentiale | |
| Nitrocellulosemembraner har mindre affinitet for nukleinsyrer. Men det har en høj affinitet for proteiner. | Nylonmembraner har et højt bindingspotentiale med nukleinsyrer end nitrocellulosemembraner. |
Sammendrag - Nitrocellulose vs Nylon Membran
Nitrocellulose og nylonmembraner er specialark, der anvendes til blottingsteknik for at reproducere båndmønsteret på gelen. De muliggør muligheden for at detektere en specifik sekvens eller et protein fra blandingerne ved at immobilisere dem på membranen. Når molekylerne immobiliseret på membranen, kan den anvendes som et substrat til hybridiseringsanalyse med mærkede prober. Nitrocellulosemembran anvendes almindeligvis til proteinpåvisning i western blottingsteknik på grund af dens høje bindingsaffinitet med proteiner. Nylon membraner bruges ofte til sydlige og nordlige blotting. Dette er forskellen mellem nitrocellulose og nylonmembran.
Referencer:
1. Hayes, P.C., C.R. Wolf og J. D. Hayes. "Blottingsteknikker til undersøgelse af DNA, RNA og proteiner. "BMJ: British Medical Journal. U. S. National Library of Medicine, 14. okt. 1989. Web. 07 april 2017
2. Mahmood, Tahrin og Ping-Chang Yang. "Western Blot: Teknik, teori og fejlfinding. "Nordamerikanske Journal of Medical Sciences. Medknow Publications & Media Pvt Ltd, september 2012. Web. 07. april 2017
Billede Courtesy:
1. "Western blot transfer" Af Bensaccount på engelsk Wikipedia (CC BY 3. 0) via Commons Wikimedia
